Badanie zespołu Hurlera z wykorzystaniem kultury komórkowej: definicja fenotypu biochemicznego i wpływ kwasu askorbinowego na zmutowaną komórkę

Fibroblasty od pacjentów z zespołem Hurlera zachowują charakterystyczny fenotyp biochemiczny, gdy hoduje się je w hodowli, która charakteryzuje się zwiększoną syntezą zarówno niesulfonowanych jak i siarczanowanych glikozoaminoglikanów. Kwas askorbinowy wzmacnia fenotypową ekspresję nieprawidłowości biochemicznych, wytwarzając nie tylko zwiększoną syntezę siarczanowanych glikozoaminoglikanów, ale selektywną retencję siarczanowanych glikozoaminoglikanów w komórce. Chociaż wzrasta również synteza niesulfonowanych glikozoaminoglikanów, związki te, zwłaszcza kwas hialuronowy, nie są zatrzymywane przez komórkę, ale są wydzielane do pożywki. Analizy moczu pacjentów z zespołem Hurlera wykazują zwiększone bezwzględne stężenia niesiarczanowanych glikozoaminoglikanów oprócz oczekiwanego wzrostu siarczanowanych glikozoaminoglikanów. Wskazuje to, że fenotyp biochemiczny zdefiniowany w kulturze komórkowej nie jest artefaktem modelu eksperymentalnego, ale odzwierciedla defekt biochemiczny pacjenta. Continue reading „Badanie zespołu Hurlera z wykorzystaniem kultury komórkowej: definicja fenotypu biochemicznego i wpływ kwasu askorbinowego na zmutowaną komórkę”

Niedobór autologicznej mieszanej reakcji limfocytów u pacjentów z pierwotną marskością żółciową.

W tym badaniu wykazano, że pacjenci z pierwotną marskością żółciową wątroby (PCB) mają wyraźny niedobór zdolności do generowania autologicznej mieszanej reakcji limfocytów (AMLR), ale mają normalną zdolność do generowania allogenicznej mieszanej reakcji limfocytów (MLR). Niedobór ten nie wynika z różnic w przebiegu czasowym odpowiedzi proliferacyjnej lub ze zmienioną odpowiedzią na zmienną liczbę komórek stymulujących. Niedobór był konsekwentnie wykrywany niezależnie od metod stosowanych do izolowania autologicznych komórek stymulujących. Obie komórki odpowiadające i komórki stymulacyjne uzyskane od pacjentów z PBC były podobne do prawidłowych komórek pod względem ich zdolności do generowania MLR w allogenicznej normalnej surowicy ludzkiej. Ponadto, surowica od pacjentów z PBC hamowała zdolność normalnych limfocytów do generowania zarówno AMLR, jak i MLR w podobnym stopniu, co sugeruje, że defekt AMLR w PBC nie jest spowodowany czynnikiem surowicy. Continue reading „Niedobór autologicznej mieszanej reakcji limfocytów u pacjentów z pierwotną marskością żółciową.”

Szybka diagnoza infekcji beztlenowych przez bezpośrednią chromatografię gaz-ciecz w spekulacjach klinicznych.

Obecne metody izolacji i identyfikacji bakterii beztlenowych są pracochłonne i czasochłonne. Postulowano, że krótkołańcuchowe kwasy tłuszczowe (SCFA) wytwarzane przez te organizmy mogą służyć jako markery drobnoustrojów w materiale klinicznym. 98 próbek ropy lub surowiczego płynu analizowano za pomocą chromatografii gaz-ciecz, a wyniki porównywano z wynikami hodowli. Znaleziono dobre korelacje dla odzyskiwania beztlenowych bakterii Gram-ujemnych oraz obecności kwasów izomasłowych, masłowych i bursztynowych. 19 z 20 próbek o znacznej ilości tych kwasów (większych niż 0,01 mumol / ml) dało bakteroidy lub fusobakterie. Continue reading „Szybka diagnoza infekcji beztlenowych przez bezpośrednią chromatografię gaz-ciecz w spekulacjach klinicznych.”

Homocystynuria z powodu niedoboru syntazy cystationinowej. Badania bilansu azotowego i wydalania siarki.

Pozorne saldo azotu i wydalanie siarki z moczem określono dla zdrowych osób, siedmiu pacjentów z niedoborem syntazy cystationinowej i pojedynczego pacjenta z cystationinurium na półsyntetycznych dietach zawierających niską odpowiednią ilość metioniny i bardzo małe ilości metioniny i bardzo małe ilości (12 mg na dobę, lub mniej) cystyny. Określono ilości dodatkowej cystyny wymaganej do zapobiegania nadmiernie wysokim stratom azotu lub siarki. Pięciu pacjentów z niedoborem syntazyzy, którzy mieli niską resztkową aktywność tego enzymu wykrytą w ekstraktach fibroblastów i / lub wątroby, nie traciło więcej azotu ani siarki na dietach praktycznie pozbawionych cystyny, niż normalni pacjenci. Wyniki te sugerują, że powszechnie wyrażana opinia, że cystyna jest niezbędnym aminokwasem dla pacjentów z niedoborem syntazy cystationinowej wymaga modyfikacji. Rezydualna aktywność enzymu wynosząca tylko kilka procent normalnej może zapobiec takiemu zapotrzebowaniu na cystynę. Continue reading „Homocystynuria z powodu niedoboru syntazy cystationinowej. Badania bilansu azotowego i wydalania siarki.”