Dodatkowa cysteina w jednym z niezwiązanych z wapniem motywów naskórkowego czynnika wzrostu podobnego do polipeptydu FBN1 jest związana z nowym wariantem zespołu Marfana.

Przedstawiamy tutaj rodzinę z fenotypem klinicznym przypominającym zespół Marfana (MFS), wykazującą przykurcz w stawie i epizody wysięku w stawie kolanowym, ale bez cech sercowo-naczyniowych tego zespołu. Fenotyp tej rodziny reprezentuje wyjątkową mieszankę objawów tkanki łącznej, z których niektóre występują w klasycznej MFS, a niektóre z nich są typowe dla dominującej ektopii soczewicowatej. Analizy sprzężeń sugerowały połączenie (LOD wynik 2,4; teta = 0) między fenotypem rodziny i markerem polimorficznym w pobliżu lokus fibryliny na chromosomie 15 (FBN1). Ponadto, zidentyfikowano nową mutację przejściową w genie FBN1 we wszystkich dotkniętych chorobą członkach rodziny. W przeciwieństwie do dotychczas zgłaszanych mutacji fibrillin, mutacja ta zastępuje cysteinę dla argininy, wytwarzając dodatkową cysteinę w jednym z niezwiązanych z wapniem motywów podobnych do EGF polipeptydu fibryliny, najprawdopodobniej zakłócając tworzenie się jednego z nich. Continue reading „Dodatkowa cysteina w jednym z niezwiązanych z wapniem motywów naskórkowego czynnika wzrostu podobnego do polipeptydu FBN1 jest związana z nowym wariantem zespołu Marfana.”

Ekspresja i funkcjonalne znaczenie alternatywnej splicingowej fibronektyny CS1 w reumatoidalnym zapaleniu stawów.

Ekspresję izoform fibronektyny (FN) zawierającą CS1, 25-aminokwasową sekwencję obecną w alternatywnie splicowanym regionie IIICS FN, analizowano w maziówce reumatoidalnego zapalenia stawów (RA). Nieoczekiwanie, warianty FN zawierające CS1 znaleziono wyłącznie na śródbłonku, ale nie w macierzy pozakomórkowej (ECM) maziówki RA. Lumenalna ekspresja CS1 na komórkach śródbłonka RA, obserwowana przez mikroskopię elektronową, korelowała ze stanem zapalnym w RA, ponieważ normalna błona maziowa wykazywała niewielką ekspresję CS1 bez zauważalnego spadku FN ECM. Ekspresję CS1 na ludzkich komórkach śródbłonka dodatkowo wykazano za pomocą analiz mRNA FN. W testach adhezji na zamrożonych odcinkach maziówkowych RA, komórki limfoblastoidalne T wyrażające funkcjonalnie aktywowaną integrynę alfa4 beta specyficznie przyłączoną do wewnątrznaczyniowej powierzchni śródbłonka RA. Continue reading „Ekspresja i funkcjonalne znaczenie alternatywnej splicingowej fibronektyny CS1 w reumatoidalnym zapaleniu stawów.”

Wpływ przewlekłej niewydolności nerek na syntezę białek i metabolizm albumin w wątrobie szczurzej.

Przewlekła niewydolność nerek u szczurów prowadzi do zmian w syntezie białek wątrobowych i metabolizmu albuminy zarówno na poziomie komórkowym, jak i molekularnym. U szczurów z przewlekłą mocznicą (poziom azotu mocznikowego we krwi większy niż 45 mg / 100 ml mo po chirurgicznym zmniejszeniu masy nerkowej), synteza białek bez komórek jest zmniejszona o 30-40% w polibiałach związanych z błoną wątrobową. Synteza albuminy przez związane z błoną polisomy w mocznicy zmniejsza się nawet bardziej niż zmniejszenie całkowitej syntezy białka. Aktywność wolnych polisomów pozostaje norma. Występuje również wewnątrzkomórkowa nagromadzenie albuminy w wątrobie szczurów z mocznicą i jednoczesny spadek albuminy surowicy. Continue reading „Wpływ przewlekłej niewydolności nerek na syntezę białek i metabolizm albumin w wątrobie szczurzej.”

Augmentacja albuminy, ale nie synteza fibrynogenu przez kortykosteroidy u pacjentów z chorobą hepatocytową

Jednoczesne badania metabolizmu albuminy i fibrynogenu zostały przeprowadzone przy użyciu metody węglanowej-14C przed i po 13-dniowym kursie prednizolonu u ośmiu pacjentów z chorobą hepatocytową. Początkowo sześciu pacjentów miało hipoalbuminemię. Średnie stężenia albuminy i fibrynogenu oraz szybkości syntezy albuminy i fibrynogenu były niższe od odpowiednich wartości w grupie osób kontrolnych. Terapia prednizolonem była związana ze znacznym wzrostem stężenia w osoczu i syntetyczną szybkością albuminy, ale zmiany w pulach albumin wewnątrznaczyniowych nie były znaczące. Uważa się, że niska częstotliwość syntezy albuminy u pacjenta z chorobą wątroby niekoniecznie oznacza maksymalną zdolność chorej wątroby do syntezy tego białka. Continue reading „Augmentacja albuminy, ale nie synteza fibrynogenu przez kortykosteroidy u pacjentów z chorobą hepatocytową”

Uwolnienie czynników mitogennych przez hodowane preadipocyty od masywnie otyłych ludzi.

W tym badaniu poszukiwano możliwych czynników parakrynnych w tkance tłuszczowej osób szczupłych i otyłych. Kondycjonowane pożywki przygotowano przez inkubację w minimalnym minimalnym medium alfa prekursorów adipocytów pochodzących od szczupłych i masywnie otyłych osobników. Kondycjonowane pożywki pochodzące od prekursora adipocytów z otyłości stymulowały replikację hodowanych szczurzych prekursorów peryferyjnych szczurów około czterokrotnie ponad kontrolę. Wpływ mediów uwarunkowanych przez prekursory pochodzące od osób szczupłych był znacznie mniej widoczny. Mitogenność kondycjonowanych pożywek została zniesiona przez trypsynę, co wskazuje na białkowy charakter czynnika (-ów) mitogennego (-ych). Continue reading „Uwolnienie czynników mitogennych przez hodowane preadipocyty od masywnie otyłych ludzi.”

Układ oksydazy z pęknięciem oddechowym w błonie plazmatycznej neutrofila.

Otrzymano dowody dotyczące sposobu, w którym oksydaza NADPH wytwarzająca O-2 z ludzkich neutrofili jest umieszczona w błonie plazmatycznej. Wytwarzanie O-2 przez cząstki z ludzkich neutrofili aktywowanych przez zymosan wzrastało dwu- do trzykrotnie, gdy cząstki były testowane w obecności odpowiednich stężeń Triton X-100. Na część aktywności ujawnionej przez detergent nie wpłynęła obróbka cząstek trypsyną lub sulfonianem p-chloromerylu, nieprzebywalnym odczynnikiem sulfhydrylowym, ale aktywność wykrywalna w nieobecności detergentu została zniesiona przez te zabiegi. Produkcję O-2 przez pęcherzyki fagocytarne nie zwiększano detergentem i prawie całkowicie eliminowano przez tryptyczne trawienie pęcherzyków, niezależnie od tego, czy detergent był obecny podczas testu. Te wyniki sugerują, że oksydaza tworząca O-2 jest wbudowana w błonę plazmatyczną z częścią rozciągającą się do cytoplazmy, a reszta zakopana w podwójnej warstwie lipidowej. Continue reading „Układ oksydazy z pęknięciem oddechowym w błonie plazmatycznej neutrofila.”

Nowy ekson w genie transbłonowego promotora konduktazy mukowiscydycznej aktywowanego przez mutację nonsensowną E92X w komórkach nabłonka dróg oddechowych pacjentów z mukowiscydozą.

Mukowiscydoza (CF) jest spowodowana przez mutacje w genie transbłonowego promotora przewodnictwa mukowiscydozy (CFTR). Opowiadamy o nowatorskiej mutacji nonsensownej, która prowadzi do pominięcia eksonu i aktywacji enkrypcyjnego egzonu. Przeszukiwanie genomowego DNA od 700 niemieckich pacjentów z CF odkryło cztery przypadki z mutacją nonsensowną E92X, transwersją G -> T, która tworzy kodon terminacyjny i wpływa na pierwszą zasadę eksonu 4 genu CFTR. Stwierdzono, że RNA limfocytów u dwóch pacjentów z CF, heterozygotycznych pod względem E92X, zawiera sekwencję typu dzikiego i izoformę z inaczej zróżnicowanym splicingiem pozbawionym egzonu 4. W RNA pochodzącym z komórek nabłonka nosa pacjentów z E92X zaobserwowano trzeci fragment o dłuższym rozmiarze. Continue reading „Nowy ekson w genie transbłonowego promotora konduktazy mukowiscydycznej aktywowanego przez mutację nonsensowną E92X w komórkach nabłonka dróg oddechowych pacjentów z mukowiscydozą.”

Donorowa mutacja miejsca splicingu w genie apolipoproteiny (Apo) C-II (Apo C-IIHamburg) pacjenta z niedoborem Apo C-II.

DNA, RNA i białko apo C-II analizowano u pacjentów z niedoborem Apo C-II (apo C-IIHamburg). Znacząco obniżone poziomy plazmy i wewnątrzwątrobowej Apolipoproteiny C-II zostały zademonstrowane przez immunoblotting i analizę immunohistochemiczną. Badania hybrydyzacji Northern, slot blot i in situ wykazały niski poziom mRNA apo C-II o prawidłowej wielkości. Żadne większe przegrupowanie genu apo C-II nie zostało wykryte metodą Southern blotting. Analiza sekwencji genomowych klonów apo C-II ujawniła podstawienie G-to-C w miejscu splicingu donorowego intronu II. Continue reading „Donorowa mutacja miejsca splicingu w genie apolipoproteiny (Apo) C-II (Apo C-IIHamburg) pacjenta z niedoborem Apo C-II.”

Immunologiczna swoistość współczynnika transferu

W tym badaniu zbadano swoistość immunologiczną współczynnika transferu przy użyciu chromatograficznie oczyszczonego preparatu czynnika przenoszącego. Specyficzność transferu badano wykorzystując odporność na hemocyjaninę KLH i tuberkulinę. Współczynnik transferu przygotowany od dawcy odpornego na KLH z powodzeniem przekazał reaktywność testu skórnego KLH 10 na 10 biorców. Przeciwnie, porównywalne ilości czynnika transferu od dwóch dawców nie odpornych na KLH nie były w stanie przenieść odporności na KLH u 11 biorców pomimo dowodów na skuteczny transfer reaktywności tuberkuliny. W przeciwieństwie do wcześniejszych badań z różnymi antygenami, odporność na KLH u biorców czynnika transferu immunologicznego KLH wydawała się porównywalna do odpowiedzi dawcy, ponieważ oba mogły być wywołane z tą samą dawką antygenu testowego skóry. Continue reading „Immunologiczna swoistość współczynnika transferu”