Ekspresja i funkcjonalne znaczenie alternatywnej splicingowej fibronektyny CS1 w reumatoidalnym zapaleniu stawów.

Ekspresję izoform fibronektyny (FN) zawierającą CS1, 25-aminokwasową sekwencję obecną w alternatywnie splicowanym regionie IIICS FN, analizowano w maziówce reumatoidalnego zapalenia stawów (RA). Nieoczekiwanie, warianty FN zawierające CS1 znaleziono wyłącznie na śródbłonku, ale nie w macierzy pozakomórkowej (ECM) maziówki RA. Lumenalna ekspresja CS1 na komórkach śródbłonka RA, obserwowana przez mikroskopię elektronową, korelowała ze stanem zapalnym w RA, ponieważ normalna błona maziowa wykazywała niewielką ekspresję CS1 bez zauważalnego spadku FN ECM. Ekspresję CS1 na ludzkich komórkach śródbłonka dodatkowo wykazano za pomocą analiz mRNA FN. W testach adhezji na zamrożonych odcinkach maziówkowych RA, komórki limfoblastoidalne T wyrażające funkcjonalnie aktywowaną integrynę alfa4 beta specyficznie przyłączoną do wewnątrznaczyniowej powierzchni śródbłonka RA. Continue reading „Ekspresja i funkcjonalne znaczenie alternatywnej splicingowej fibronektyny CS1 w reumatoidalnym zapaleniu stawów.”

Wpływ przewlekłej niewydolności nerek na syntezę białek i metabolizm albumin w wątrobie szczurzej.

Przewlekła niewydolność nerek u szczurów prowadzi do zmian w syntezie białek wątrobowych i metabolizmu albuminy zarówno na poziomie komórkowym, jak i molekularnym. U szczurów z przewlekłą mocznicą (poziom azotu mocznikowego we krwi większy niż 45 mg / 100 ml mo po chirurgicznym zmniejszeniu masy nerkowej), synteza białek bez komórek jest zmniejszona o 30-40% w polibiałach związanych z błoną wątrobową. Synteza albuminy przez związane z błoną polisomy w mocznicy zmniejsza się nawet bardziej niż zmniejszenie całkowitej syntezy białka. Aktywność wolnych polisomów pozostaje norma. Występuje również wewnątrzkomórkowa nagromadzenie albuminy w wątrobie szczurów z mocznicą i jednoczesny spadek albuminy surowicy. Continue reading „Wpływ przewlekłej niewydolności nerek na syntezę białek i metabolizm albumin w wątrobie szczurzej.”

Zmniejszenie aktywności syntetazy uroporfirydynowej I w komórkach I w przerywanej ostrej porfirii

Intermittent ostrą porfirię ostatnio wyodrębniono biochemicznie z innych genetycznych porfirii wątrobowych poprzez obserwację zmniejszonej aktywności syntetazy wątrobowej uroporfirynogenu I i zwiększoną aktywność syntetazy kwasu . -aminolewulinowego. Ponieważ niedobór syntetazy uroporfirynogenu I może znaleźć odzwierciedlenie w tkankach nie wątrobowych, przetestowaliśmy ten enzym w hemolizatach czerwonych krwinek od osób nieperfirycznych i od pacjentów z genetyczną porfirią wątrobową. Jedynie pacjenci z przerywaną ostrą porfirią zmniejszyli aktywność syntetazy uroporfirynogenu erytrocytów, która wynosiła około 50% normy. Pozorna Km częściowo oczyszczonej syntetazy uroporfirynogenu I wynosiła 6 × 10 <6 m zarówno w przypadku substancji nieopijowych, jak i pacjentów z przerywaną ostrą porfirią. Continue reading „Zmniejszenie aktywności syntetazy uroporfirydynowej I w komórkach I w przerywanej ostrej porfirii”

Uwolnienie czynników mitogennych przez hodowane preadipocyty od masywnie otyłych ludzi.

W tym badaniu poszukiwano możliwych czynników parakrynnych w tkance tłuszczowej osób szczupłych i otyłych. Kondycjonowane pożywki przygotowano przez inkubację w minimalnym minimalnym medium alfa prekursorów adipocytów pochodzących od szczupłych i masywnie otyłych osobników. Kondycjonowane pożywki pochodzące od prekursora adipocytów z otyłości stymulowały replikację hodowanych szczurzych prekursorów peryferyjnych szczurów około czterokrotnie ponad kontrolę. Wpływ mediów uwarunkowanych przez prekursory pochodzące od osób szczupłych był znacznie mniej widoczny. Mitogenność kondycjonowanych pożywek została zniesiona przez trypsynę, co wskazuje na białkowy charakter czynnika (-ów) mitogennego (-ych). Continue reading „Uwolnienie czynników mitogennych przez hodowane preadipocyty od masywnie otyłych ludzi.”

Nowy ekson w genie transbłonowego promotora konduktazy mukowiscydycznej aktywowanego przez mutację nonsensowną E92X w komórkach nabłonka dróg oddechowych pacjentów z mukowiscydozą.

Mukowiscydoza (CF) jest spowodowana przez mutacje w genie transbłonowego promotora przewodnictwa mukowiscydozy (CFTR). Opowiadamy o nowatorskiej mutacji nonsensownej, która prowadzi do pominięcia eksonu i aktywacji enkrypcyjnego egzonu. Przeszukiwanie genomowego DNA od 700 niemieckich pacjentów z CF odkryło cztery przypadki z mutacją nonsensowną E92X, transwersją G -> T, która tworzy kodon terminacyjny i wpływa na pierwszą zasadę eksonu 4 genu CFTR. Stwierdzono, że RNA limfocytów u dwóch pacjentów z CF, heterozygotycznych pod względem E92X, zawiera sekwencję typu dzikiego i izoformę z inaczej zróżnicowanym splicingiem pozbawionym egzonu 4. W RNA pochodzącym z komórek nabłonka nosa pacjentów z E92X zaobserwowano trzeci fragment o dłuższym rozmiarze. Continue reading „Nowy ekson w genie transbłonowego promotora konduktazy mukowiscydycznej aktywowanego przez mutację nonsensowną E92X w komórkach nabłonka dróg oddechowych pacjentów z mukowiscydozą.”

Donorowa mutacja miejsca splicingu w genie apolipoproteiny (Apo) C-II (Apo C-IIHamburg) pacjenta z niedoborem Apo C-II.

DNA, RNA i białko apo C-II analizowano u pacjentów z niedoborem Apo C-II (apo C-IIHamburg). Znacząco obniżone poziomy plazmy i wewnątrzwątrobowej Apolipoproteiny C-II zostały zademonstrowane przez immunoblotting i analizę immunohistochemiczną. Badania hybrydyzacji Northern, slot blot i in situ wykazały niski poziom mRNA apo C-II o prawidłowej wielkości. Żadne większe przegrupowanie genu apo C-II nie zostało wykryte metodą Southern blotting. Analiza sekwencji genomowych klonów apo C-II ujawniła podstawienie G-to-C w miejscu splicingu donorowego intronu II. Continue reading „Donorowa mutacja miejsca splicingu w genie apolipoproteiny (Apo) C-II (Apo C-IIHamburg) pacjenta z niedoborem Apo C-II.”

Wpływ kortykosteroidów in vitro na aktywację, proliferację i różnicowanie komórek B.

Niniejsze badanie pokazuje stopniowy wpływ kortykosteroidów in vitro (CSs) na różne fazy aktywacji, proliferacji i różnicowania komórek B. Wczesne zdarzenia, takie jak aktywacja i proliferacja komórek B o wysokiej dawce anty-mu lub stymulowanych przez Staphylococcus aureus, są głęboko tłumione przez obecność CS in vitro. W hamowanej odpowiedzi proliferacyjnej może pośredniczyć bezpośredni wpływ na komórki B i / lub modulacja funkcji komórek pomocniczych. Późniejsze zdarzenia w cyklu komórek B, takie jak odpowiedź proliferacyjna na czynnik wzrostu komórek B po aktywacji in vivo lub in vitro, są mniej wrażliwe na działanie hamujące CS in vitro. Ostatnie wydarzenia w cyklu komórek B; mianowicie, zróżnicowanie do stanu wytwarzania immunoglobuliny, nie jest tłumione przez CS in vitro. Continue reading „Wpływ kortykosteroidów in vitro na aktywację, proliferację i różnicowanie komórek B.”