Aktywność nowotworowa ludzkich monocytów aktywowanych in vitro przez wolne limfokiny ludzkie i otoczone liposomami.

Ludzkie jednojądrzaste komórki krwi obwodowej od zdrowych dawców uzyskane przez rozdzielenie na gradiencie Percoll inkubowano z wolnymi lub blokowanymi liposomami limfocytami wytworzonymi z limfocytów stymulowanych konkanawaliną A, a następnie testowano pod kątem aktywności cytotoksycznej wobec komórek nowotworowych. Traktowane monocyty poddawano lizie komórek docelowych czerniaka nowotworowego i glioblastoma, ale nie miały wpływu na trzy typy niejonogennych komórek docelowych. Aktywacja monocytów, które stały się nowotworobójcze, powodowana była przez czynnik aktywujący makrofagi (MAF), a nie przez zanieczyszczenie endotoksynami, konkanawaliną A lub interferonem. Endocytoza liposomów zawierających MAF, ale bez tych zawierających supernatanty kontrolne, doprowadziła do aktywacji właściwości cytotoksycznych w monocytach. Aktywacja za pomocą MAF w kapsułkach liposomowych była bardzo skuteczna i wymagała mniej niż 1/80 objętości wolnej MAF niezbędnej do uzyskania takich samych poziomów cytotoksyczności. Continue reading „Aktywność nowotworowa ludzkich monocytów aktywowanych in vitro przez wolne limfokiny ludzkie i otoczone liposomami.”

Lipoksygenacja kwasu arachidonowego jako źródła polimorfojądrowych czynników chemotaktycznych leukocytów w płynie maziowym i tkankach w reumatoidalnym zapaleniu stawów i spondyloartrozie.

Continue reading „Lipoksygenacja kwasu arachidonowego jako źródła polimorfojądrowych czynników chemotaktycznych leukocytów w płynie maziowym i tkankach w reumatoidalnym zapaleniu stawów i spondyloartrozie.”

Transplacental immunization ludzkiego płodu na tężec przez immunizację matki.

Eksperymentalne badania na szczurach wykazały, że immunizacja ciężarnej kobiety doprowadziła do transplacentalnej immunizacji jej płodów. Możliwość, że to również miało miejsce u ludzi, została zbadana przez immunizację 42 ciężarnych kobiet toksoidem tężcowym (2,5 lub 5 Lf) w piątym i ósmym miesiącu ciąży i porównanie odpowiedzi immunologicznych ich potomstwa z odpowiedziami potomstwa 25 nieimmunizowanych matek. . Jedynie potomstwo immunizowanych matek zostało uczulone na tężec. Przeciwciała przeciwko antygenowi IgM znajdowały się we krwi przed immunizacją błoniczą, krztuścem, szczepionką przeciw tężcowi (DPT), miały szybszą odpowiedź (P mniejszą niż 0,01) na immunizację DPT i nadal były silnie uczulone (P poniżej 0,01) na tężec 13 miesięcy po urodzeniu. Continue reading „Transplacental immunization ludzkiego płodu na tężec przez immunizację matki.”

Wpływ szybko działającego inhibitora aktywatora plazminogenu na trombolizę in vivo indukowaną przez tkankowy aktywator plazminogenu u królików. Interferencja składników pochodzących z tkanek.

W badaniach na królikach z żylnym zakrzepem żył badano wpływ podwyższonych poziomów indukowanego endotoksyną w osoczu szybko działającego inhibitora aktywatora plazminogenu (inhibitor PA) na trombolizę. Infuzja aktywatora plazminogenu ludzkiego tkanek (t-PA) powodowała podobne stopnie trombolizy u królików leczonych kontrolą i potraktowanych endotoksyną, chociaż nie można było wykazać żadnego wolnego t-PA w osoczu zwierząt leczonych endotoksyną. Infuzja t-PA w pozaustrojowym przecieku tętniczo-żylnym spowodowała utratę aktywności trombolitycznej u zwierząt leczonych endotoksyną, ale nie u zwierząt kontrolnych. Skrzepy krwi uległy nadekspresji in vitro z mieszaninami t-PA i normalnej plazmy zlizowanej w przeciwieństwie do skrzepów, które uległy supuzji z osoczem bogatym w t-PA i bogate w inhibitor PA. Jednak dodanie plastrów płuca królika do osocza otaczającego skrzep krwi, odwróciło hamowanie trombolizy osoczem bogatym w inhibitor PA. Continue reading „Wpływ szybko działającego inhibitora aktywatora plazminogenu na trombolizę in vivo indukowaną przez tkankowy aktywator plazminogenu u królików. Interferencja składników pochodzących z tkanek.”

Pomiar syntetycznej szybkości bilirubiny ze wzgórz wątrobowych u pacjentów z ostrą porfirią przerywaną

Zaproponowano nową metodę bezpośredniego pomiaru in vivo syntetycznego wskaźnika stężenia bilirubiny w wątrobie. Ta metoda zależy od zastosowania znakowanego związku prekursor-produkt do puli wątrobowej porfobilinogenu, który jest powszechnym prekursorem zarówno porfobilinogenu w moczu, jak i bilirubiny syntetyzowanej w wątrobie. Pula wątroby porfobilinogenu jest znakowana za pomocą dożylnego wstrzyknięcia kwasu 4- -aminolewulinowego-4-14C. Udział całkowitej produkcji bilirubiny pochodzącej ze spirali wątrobowej oblicza się ze stosunku średnich aktywności swoistych dla 14C sterkobiliny i porfobilinogenu, oszacowanych odpowiednio w połączonych próbkach kału i moczu. Metoda ta może być najłatwiej zastosowana u pacjentów z ostrą przerywaną porfirią, ponieważ znaczne ilości prophobilinogenu w moczu tych pacjentów znacznie ułatwiają pomiar specyficznej aktywności porfobilinogenu-14C. Continue reading „Pomiar syntetycznej szybkości bilirubiny ze wzgórz wątrobowych u pacjentów z ostrą porfirią przerywaną”

Tworzące piankę makrofagi J774 wykazują znacznie podwyższoną aktywność acylo-koenzymu A: cholesterol acylotransferazy w porównaniu z mysimi makrofagami otrzewnowymi w obecności lipoproteiny o małej gęstości (LDL) pomimo podobnej aktywności receptora

Akumulacja estru cholesterylu (CE) w makrofagach ściany tętnic (komórki piankowate) jest dominującą cechą zmian miażdżycowych. Wcześniej wykazaliśmy, że mysie makrofagi J774, w przeciwieństwie do makrofagów otrzewnowych myszy, akumulują duże ilości CE z niezmodyfikowanej lipoproteiny o niskiej gęstości (LDL). Obecnie podajemy bezpośrednie porównanie acylotransferazy acylo-koenzymu A: cholesterol acylotransferazy (ACAT) w J774 i mysich makrofagów otrzewnowych myszy. Pomimo podobnej degradacji hamowanej chlorochiną 125I-LDL w dwóch makrofagach, aktywność ACAT w makrofagach J774 traktowanych LDL była 10-30-krotnie wyższa niż w makrofagach otrzewnowych myszy leczonych LDL. W przeciwieństwie do tego, acetyl-LDL (dopasowany do degradacji za pomocą LDL) powodował znaczną stymulację aktywności ACAT w makrofagach otrzewnowych myszy. Continue reading „Tworzące piankę makrofagi J774 wykazują znacznie podwyższoną aktywność acylo-koenzymu A: cholesterol acylotransferazy w porównaniu z mysimi makrofagami otrzewnowymi w obecności lipoproteiny o małej gęstości (LDL) pomimo podobnej aktywności receptora”

Humoralna odpowiedź immunologiczna na szczepienie przeciw grypie u pacjentów z pierwotną immunoglobuliną A nefropatię. Analiza rozkładu izotypu i wielkości przeciwciał swoistych dla grypy.

Pierwotna nefropatia IgA (IgA) charakteryzuje się złogami mezangialnymi IgAl, zwiększonymi poziomami IgA1 w surowicy i krążącymi kompleksami immunologicznymi zawierającymi głównie IgAl. Wcześniej stwierdzono, że pacjenci z IgAN mają wyższą niż normalną odpowiedź IgA na szczepienie, ale podklasy IgA nie były badane. Aby zbadać, czy nadreaktywność IgA jest ograniczona do podklasy IgA1, która bierze udział w patogenezie IgA, porównaliśmy odpowiedzi immunologiczne 18 pacjentów z 22 zdrowymi kontrolami po szczepieniu domięśniowym inaktywowanym wirusem grypy. Miana przeciwciał były istotnie wyższe (P mniejsze niż 0,0001) dla podklasy IgAl u pacjentów w porównaniu do kontroli, ale nie dla innych izotypów. Znaczna część odpowiedzi immunologicznej antygenu IgA i IgA1 obejmowała polimery zarówno u pacjentów, jak i u osób kontrolnych. Continue reading „Humoralna odpowiedź immunologiczna na szczepienie przeciw grypie u pacjentów z pierwotną immunoglobuliną A nefropatię. Analiza rozkładu izotypu i wielkości przeciwciał swoistych dla grypy.”

Podstawienie aminokwasu (Ile194 —- Thr) w eksonie 5 genu lipazy lipoproteinowej powoduje niedobór lipazy lipoproteinowej w trzech niespokrewnionych probandach. Wsparcie dla wielokentrycznego pochodzenia.

Badania dotyczące biologii molekularnej niedoboru lipazy lipoproteinowej (LPL) zostały ułatwione dzięki dostępności sond genowych LPL i niedawnej charakteryzacji mutacji genowych leżących u podstaw ludzkiego niedoboru LPL. Zazwyczaj dominowały mutacje missense i wykazują preferencyjną lokalizację do eksonów 4 i 5. Dystrybucja ta wspiera wcześniejsze badania przypisujące znaczenie funkcjonalne do reszt kodowanych przez te eksony. Zgłaszamy teraz kolejną mutację missense w eksonie 5 genu LPL u trzech niepowiązanych pacjentów. Amplifikacja poszczególnych egzonów przez reakcję łańcuchową polimerazy i bezpośrednie sekwencjonowanie ujawniła przejście T —- C w kodonie 194 cDNA LPL, co powoduje substytucję treoniny dla izoleucyny w tej reszcie. Continue reading „Podstawienie aminokwasu (Ile194 —- Thr) w eksonie 5 genu lipazy lipoproteinowej powoduje niedobór lipazy lipoproteinowej w trzech niespokrewnionych probandach. Wsparcie dla wielokentrycznego pochodzenia.”

Rola wiązania fibronektyny w szczurzym modelu doświadczalnego zapalenia wsierdzia wywołanym przez Streptococcus sanguis.

Inaktywacja wiązania fibronektyny (Fn) przez insercyjną mutagenezę Streptococcus sanguis z Tn916 zmniejsza wirulencję tej bakterii w szczurzym modelu infekcyjnego zapalenia wsierdzia (IE). Transkoniuganty badano przesiewowo pod kątem przylegania Fn, stosując test przylegania ELISA. Jeden transkoniugant wykazywał zmniejszone przyleganie do unieruchomionego Fn. Hybrydyzacja południowa wykazała, że insercja wystąpiła tylko raz w tym mutancie. Szczep macierzysty i zmutowany szczep JL113 zastosowano jako szczepy prowokacyjne w modelu szczurzego zapalenia wsierdzia. Continue reading „Rola wiązania fibronektyny w szczurzym modelu doświadczalnego zapalenia wsierdzia wywołanym przez Streptococcus sanguis.”

Obrót neutrofili w normalnych płucach królika.

Obrót neutrofilów badano we krwi i pęcherzykach zwykłych królików. Obrót granulocytów obojętnochłonnych krwi zbadano dwiema różnymi metodami. W pierwszej metodzie neutrofile królika dawcy znakowano in vivo przez dożylne podanie tymidyn znakowanej trytem. Po 72 h odbierające króliki otrzymały krew od dawców. Spadek radioaktywności właściwej neutrofili we krwi został wykorzystany do określenia, że ich okres półtrwania wynosił 4,03 h. Continue reading „Obrót neutrofili w normalnych płucach królika.”