Nadreaktywność odpowiedzi leukotaktycznej neutrofili podczas aktywnej infekcji bakteryjnej

Aby ustalić, czy podczas aktywnej infekcji bakteryjnej występują zmiany w funkcji leukocytów obojętnochłonnych, porównano liczbę neutrofilów z 25 pacjentów z czynną infekcją bakteryjną i 25 dopasowanych wiekowo osób z grupy kontrolnej pod względem aktywności leukotaktycznej, losowej mobilności i redukcji nitroblue tetrazolium. Leukocyty neutrofilowe pacjentów z infekcją bakteryjną wykazywały nadpobudliwość w ruchu jednokierunkowym w kierunku bodźca chemotaktycznego mierzonego w teście leukotaktycznym i zwykle miały zwiększoną redukcję nitroblue tetrazoliową. Średni wskaźnik leukotaktyczny wynosił 165. 56 u pacjentów z zakażeniem bakteryjnym i 70. 11 w grupie kontrolnej (p <0,001). Continue reading „Nadreaktywność odpowiedzi leukotaktycznej neutrofili podczas aktywnej infekcji bakteryjnej”

Octan mirystynianu pothoru stymuluje zależny od ATP transport wapnia przez błonę komórkową neutrofili.

Badaliśmy wpływ octanu mirystynianu forbolu (PMA) na zależną od ATP zależną od ATP pompę wapniową w neutrofilach. Frakcje wzbogacone w błony komórkowe ( podosomy ) ze stymulowanych PMA neutrofili świnki morskiej wykazywały podwójną stymulację zależnego od ATP transportu wapnia w porównaniu z podosomami kontrolnymi. Efekt stymulacyjny był szybki (początek mniej niż 2 min po ekspozycji na PMA) i osiągnął maksymalne wartości w ciągu 5 minut. PMA zwiększył maksymalną prędkość, ale nie powinowactwo pompy wapniowej do Ca ++. Aktywacja pompy nie była poprzedzona wzrostem stężenia wolnego wapnia w cytozolach [Ca ++] i, co oceniono za pomocą wewnątrzkomórkowo uwięzionego fluorescencyjnego wskaźnika wapnia Quin 2, ale zamiast tego nieznacznie obniżono [Ca ++] i zapobiegając wzrostowi [Ca ++] i normalnie indukowanemu przez peptyd chemotaktyczny formyl-metionyl-leucylo-fenyloalanina. Continue reading „Octan mirystynianu pothoru stymuluje zależny od ATP transport wapnia przez błonę komórkową neutrofili.”

Regulacja in vivo sekrecji oskrzelowych komórek Clara u szczurów.

Zastosowaliśmy ultrastrukturalne metody morfometryczne do badania regulacji wydzielania in vivo przez komórki Clary szczurów z bronchiolami. Badane komórki Clara znajdowały się w drogach oddechowych o wewnętrznej średnicy 0,21 +/- 0,06 mm (średnia . SD) przy ciśnieniu transpulnownym 20 cm H2O. Stwierdziliśmy, że pilokarpina powodowała 50% spadek gęstości objętościowej wydzielniczych granulek komórek Clara w 60 minut i że atropina blokowała ten efekt. Izoproterenol spowodował podobny spadek gęstości objętościowej, który został zablokowany przez propranolol. Continue reading „Regulacja in vivo sekrecji oskrzelowych komórek Clara u szczurów.”

Zmniejszenie zawartości hormonu uwalniającego hormon wzrostu i przysadki w niedoczynności tarczycy.

Porównano wpływ usunięcia hormonów tarczycy (Tx) i tyroksyny (T4Rx) na wydzielanie przysadki hormonu wzrostu (GH) i stężenia podwzgórzowego hormonu uwalniającego hormon wzrostu (GRH) w celu określenia mechanizmu niedoboru GH związanego z niedoczynnością tarczycy. U szczurów poddanych tariacji stwierdzono całkowitą utratę pulsacyjnego wydzielania GH z rozległym zmniejszeniem odpowiedzi GRH i przysadkowej zawartości GH. Hodowane komórki przysadki od szczurów Tx wykazywały zmniejszoną wrażliwość GRH, maksymalną reaktywność GH i akumulację wewnątrzkomórkowego cyklicznego AMP do GRH, podczas gdy działanie supresyjne somatostatyny (SRIF) na wydzielanie GH było zwiększone. Zawartość podwzgórza GRH również uległa znacznemu zmniejszeniu. T4Rx całkowicie odnowił podwzgórzową zawartość GRH i spontaniczne wydzielanie GH pomimo jedynie częściowego odzyskania przysadkowej zawartości GH, wrażliwości GRH i SRIF oraz wewnątrzkomórkowej odpowiedzi cyklicznego AMP na GRH. Continue reading „Zmniejszenie zawartości hormonu uwalniającego hormon wzrostu i przysadki w niedoczynności tarczycy.”

Działanie embriotoksyczne krótkotrwałej hipoglikemii insuliny u matki podczas organogenezy u szczurów.

Aby sprawdzić, czy hipoglikemia u matki może upośledzać organogenezę, wywołaliśmy krótką glukopopenię za pomocą insuliny u przytomnych ciężarnych szczurów podczas fazy headfold lub etapu wczesnego zamknięcia cewy nerwowej w embriogenezie. Za każdym razem 10 par zwierząt otrzymywało identyczne infuzje insuliny przez godzinę. Połowę zwierząt utrzymywano w euglikemii podczas infuzji, podczas gdy pozostali mieli możliwość hipoglikemii. Utrzymywanie lub przywracanie euglikemii u wszystkich zwierząt natychmiast po ustaniu insuliny. Spontaniczna aktywność została zmniejszona podczas hipoglikemii, ale świadomość została zachowana. Continue reading „Działanie embriotoksyczne krótkotrwałej hipoglikemii insuliny u matki podczas organogenezy u szczurów.”

Wzmocnienie jednojądrowej aktywności prokoagulacyjnej przez kwas 12-hydroksyeikosatetraenowy płytek krwi.

Płytki krwi indukują wytwarzanie aktywności czynnika prokoagulacyjnego (TFa) przez jednojądrzaste leukocyty, a także wzmacniają TFa indukowane przez endotoksynę. Nasze obecne badanie wykazało, że kwas arachidonowy, który sam w sobie nie miał wpływu na jednojądrzaste TFa, znacznie poprawił TFa wywołany płytkami krwi. Efekt był zależny od stężenia zarówno dla płytek jak i arachidonianu (1-20 mikroM); inne testowane kwasy tłuszczowe były nieaktywne. Nasilające działanie arachidonianu było bardziej wyraźne, jeśli płytki wystawiono na działanie aspiryny, co sugeruje zaangażowanie lipooksygenazy. Wytwarzanie kwasu 12-hydroksyeikosatetraenowego (12-HETE) wykazano biochemicznie w preparatach z płytek krwi / arachidonianu / jednojądrzastych traktowanych aspiryną, które wytworzyły wysokie poziomy TFa. Continue reading „Wzmocnienie jednojądrowej aktywności prokoagulacyjnej przez kwas 12-hydroksyeikosatetraenowy płytek krwi.”

Mechanizmy zaburzeń metabolizmu białek mięśniowych u szczurów z przewlekłą mocznicą. Wpływ kwasicy metabolicznej.

Przewlekła niewydolność nerek (CRF) jest związana z kwasicą metaboliczną i nieprawidłowym metabolizmem białek mięśniowych. Jak wykazaliśmy, że kwasica sama w sobie stymuluje degradację białka mięśniowego za pomocą mechanizmu zależnego od glukokortykoidów, oceniliśmy udział kwasicy w zmianach w obrocie białek mięśniowych w CRF. Stabilny model mocznicy osiągnięto u częściowo nefrektomizowanych szczurów (osoczowy mocznik azotu, 100-120 mg / dl, wodorowęglan krwi mniejszy niż 21 meq / litr). Szczury CRF wydalały o 22% więcej azotu niż kontrole z paszą (P poniżej 0,005), więc synteza i degradacja białka mięśniowego była mierzona w perfuzach tylnych. Szczury CRF miały 90% wzrost degradacji białka netto (P mniejsze niż 0,001); zostało to skorygowane przez wodorowęglan diety. Continue reading „Mechanizmy zaburzeń metabolizmu białek mięśniowych u szczurów z przewlekłą mocznicą. Wpływ kwasicy metabolicznej.”

Kontrola aktywności sucrazowej jelita czczego i maltazy przez dietetyczną sacharozę fruktozy u człowieka: model badania regulacji enzymów u człowieka

Zbadano specyficzny wpływ cukrów dietetycznych na aktywność disacharydazy jelita czczego u siedmiu normalnych, niezatężonych ochotników płci męskiej. Badanymi cukrami były sacharoza, maltoza, laktoza, glukoza, fruktoza i galaktoza. Dokonano porównania wpływu każdego cukru na izowaloryczną dietę płynną. U wszystkich osób karmienie sacharozą, w porównaniu do karmienia glukozą, znacznie zwiększyło aktywność sutka jelita czczego (S) i maltazę (M), ale nie aktywność laktazy (L). Wskaźniki S / L i M / L wzrosły w znacznym stopniu. Continue reading „Kontrola aktywności sucrazowej jelita czczego i maltazy przez dietetyczną sacharozę fruktozy u człowieka: model badania regulacji enzymów u człowieka”

Biosynteza leukotrienów przez leukocyty polimorfojądrowe od dwóch pacjentów z przewlekłą chorobą ziarniniakową.

Polimorfonuklearne leukocyty (PMNL) wyizolowane od dwóch pacjentów z przewlekłą chorobą ziarniniakową (CGD) badano pod kątem ich zdolności do metabolizowania kwasu arachidonowego do produktów lipooksygenazy, w tym 5 (S), 12 (R) -dihydroksy-6,14-cis-8,10 kwas trans-eikozatetraenowy (LTB4). Analizy inkubacji tych PMNL z kwasem arachidonowym i jonoforem wapnia A23187 nie różniły się od jednoczesnych kontroli wytwarzania LTB4, innych kwasów 5,12-dihydroksy-eikozatetraenowych lub kwasów monohydroksy-eikozatetraenowych. Rozpoznanie kliniczne CGD potwierdzono w obu przypadkach przez oznaczenie chemiluminescencji PMNL. Leukocyty od obu pacjentów nie wytwarzały aktywnych gatunków tlenu w odpowiedzi na LTB4 lub formyl-metionyl-leucylo-fenyloalaninę. Obserwacja utleniania kwasu arachidonowego pod nieobecność anionu ponadtlenkowego wyklucza rolę aktywnych gatunków tlenu w tym procesie metabolicznym. Continue reading „Biosynteza leukotrienów przez leukocyty polimorfojądrowe od dwóch pacjentów z przewlekłą chorobą ziarniniakową.”

Limfocyty wiążące białko C-reaktywne podczas ostrej gorączki reumatycznej.

Limfocyty wiążące białko C-reaktywne (CRP) badano u 31 pacjentów z ostrą gorączką reumatyczną i 30 osobami kontrolnymi, które były dziećmi. Zaznaczone wzrosty w obu proporcjach i bezwzględna liczba limfocytów wiążących CRP odnotowano w gorączce reumatycznej (P mniej niż 0,001). Nie stwierdzono wyraźnej korelacji pomiędzy CRP w osoczu, jak określono ilościowo za pomocą testu radioimmunologicznego i proporcji lub liczby komórek wiążących CRP. Eksperymenty z podwójnym znakowaniem wykazały, że 60-80% limfocytów wiążących CRP również wykazywało receptory Fc reagujące ze sprzężonymi z fluoresceiną agregatami IgG. Przejście limfocytów przez kolumny Ig – anty-IgG, usunęło komórki z powierzchnią Ig, ale nie limfocytami wiążącymi CRP. Continue reading „Limfocyty wiążące białko C-reaktywne podczas ostrej gorączki reumatycznej.”