Nadreaktywność odpowiedzi leukotaktycznej neutrofili podczas aktywnej infekcji bakteryjnej

Aby ustalić, czy podczas aktywnej infekcji bakteryjnej występują zmiany w funkcji leukocytów obojętnochłonnych, porównano liczbę neutrofilów z 25 pacjentów z czynną infekcją bakteryjną i 25 dopasowanych wiekowo osób z grupy kontrolnej pod względem aktywności leukotaktycznej, losowej mobilności i redukcji nitroblue tetrazolium. Leukocyty neutrofilowe pacjentów z infekcją bakteryjną wykazywały nadpobudliwość w ruchu jednokierunkowym w kierunku bodźca chemotaktycznego mierzonego w teście leukotaktycznym i zwykle miały zwiększoną redukcję nitroblue tetrazoliową. Średni wskaźnik leukotaktyczny wynosił 165. 56 u pacjentów z zakażeniem bakteryjnym i 70. 11 w grupie kontrolnej (p <0,001). Continue reading „Nadreaktywność odpowiedzi leukotaktycznej neutrofili podczas aktywnej infekcji bakteryjnej”

Rola aktywacji kinazy białkowej C w stymulacji proliferacji nabłonka okrężnicy i reaktywnego tworzenia tlenu przez kwasy żółciowe.

Deoksycholan (DOC), chenodeoksycholan, 12-O-tetradekanoiloforbol-13-octan (TPA) lub 1-oleoilo-2-acetylo-gliceryna (OAG) aktywowały kinazę nabłonka okrężnicy C, co odzwierciedla translokacja z substancji rozpuszczalnej do cząstek stałych. frakcja komórkowa. Aktywacja kinazy białkowej C była skorelowana ze stymulacją zwiększonej aktywności proliferacyjnej błony śluzowej okrężnicy i reaktywnego wytwarzania tlenu. TPA i OAG, ale nie DOC, aktywowały bezpośrednio in vitro kinazę rozpuszczalnego białka. Jednakże, DOC szybko zwiększył znakowaną akumulację fosforanu inozytolu i diacyloglicerolu w komórkach nabłonka okrężnicy. Continue reading „Rola aktywacji kinazy białkowej C w stymulacji proliferacji nabłonka okrężnicy i reaktywnego tworzenia tlenu przez kwasy żółciowe.”

Regulacja in vivo sekrecji oskrzelowych komórek Clara u szczurów.

Zastosowaliśmy ultrastrukturalne metody morfometryczne do badania regulacji wydzielania in vivo przez komórki Clary szczurów z bronchiolami. Badane komórki Clara znajdowały się w drogach oddechowych o wewnętrznej średnicy 0,21 +/- 0,06 mm (średnia . SD) przy ciśnieniu transpulnownym 20 cm H2O. Stwierdziliśmy, że pilokarpina powodowała 50% spadek gęstości objętościowej wydzielniczych granulek komórek Clara w 60 minut i że atropina blokowała ten efekt. Izoproterenol spowodował podobny spadek gęstości objętościowej, który został zablokowany przez propranolol. Continue reading „Regulacja in vivo sekrecji oskrzelowych komórek Clara u szczurów.”

Zmniejszenie zawartości hormonu uwalniającego hormon wzrostu i przysadki w niedoczynności tarczycy.

Porównano wpływ usunięcia hormonów tarczycy (Tx) i tyroksyny (T4Rx) na wydzielanie przysadki hormonu wzrostu (GH) i stężenia podwzgórzowego hormonu uwalniającego hormon wzrostu (GRH) w celu określenia mechanizmu niedoboru GH związanego z niedoczynnością tarczycy. U szczurów poddanych tariacji stwierdzono całkowitą utratę pulsacyjnego wydzielania GH z rozległym zmniejszeniem odpowiedzi GRH i przysadkowej zawartości GH. Hodowane komórki przysadki od szczurów Tx wykazywały zmniejszoną wrażliwość GRH, maksymalną reaktywność GH i akumulację wewnątrzkomórkowego cyklicznego AMP do GRH, podczas gdy działanie supresyjne somatostatyny (SRIF) na wydzielanie GH było zwiększone. Zawartość podwzgórza GRH również uległa znacznemu zmniejszeniu. T4Rx całkowicie odnowił podwzgórzową zawartość GRH i spontaniczne wydzielanie GH pomimo jedynie częściowego odzyskania przysadkowej zawartości GH, wrażliwości GRH i SRIF oraz wewnątrzkomórkowej odpowiedzi cyklicznego AMP na GRH. Continue reading „Zmniejszenie zawartości hormonu uwalniającego hormon wzrostu i przysadki w niedoczynności tarczycy.”

Nowa funkcja lipoprotein o wysokiej gęstości. Ich udział w wewnątrznaczyniowych reakcjach bakteryjnych lipopolisacharydów.

Dodanie bakteryjnego lipopolisacharydu (LPS) z Escherichia coli 0111: B4 lub Salmonella minnesota R595 do osocza (lub surowicy) spowodowało wyraźne zmniejszenie uwodnionej gęstości pławności macierzystego LPS (0111: B4 [d = 1,44 g / cm3] i R595 [d = 1,38 g / cm3]) do d mniej niż 1,2 g / cm3. To zmniejszenie gęstości wyporności do mniej niż 1,2 g / cm3 LPS wymagało lipidy w osoczu (lub surowicy). Delipidowanie osocza (lub surowicy) przez ekstrakcję eterem n-butanol / diizopropylowym (40/60, obj .: obj.) Zapobiegło przekształceniu macierzystego LPS w postać o wartości d poniżej 1,2 g / cm3. Odwrócenie efektu delipidacji osiągnięto przez dodanie fizjologicznych stężeń lipoprotein o dużej gęstości (HDL). Natomiast dwa razy więcej niż normalne stężenie lipoprotein o niskiej gęstości lub bardzo małej gęstości było nieskuteczne. Continue reading „Nowa funkcja lipoprotein o wysokiej gęstości. Ich udział w wewnątrznaczyniowych reakcjach bakteryjnych lipopolisacharydów.”

Wzmocnienie jednojądrowej aktywności prokoagulacyjnej przez kwas 12-hydroksyeikosatetraenowy płytek krwi.

Płytki krwi indukują wytwarzanie aktywności czynnika prokoagulacyjnego (TFa) przez jednojądrzaste leukocyty, a także wzmacniają TFa indukowane przez endotoksynę. Nasze obecne badanie wykazało, że kwas arachidonowy, który sam w sobie nie miał wpływu na jednojądrzaste TFa, znacznie poprawił TFa wywołany płytkami krwi. Efekt był zależny od stężenia zarówno dla płytek jak i arachidonianu (1-20 mikroM); inne testowane kwasy tłuszczowe były nieaktywne. Nasilające działanie arachidonianu było bardziej wyraźne, jeśli płytki wystawiono na działanie aspiryny, co sugeruje zaangażowanie lipooksygenazy. Wytwarzanie kwasu 12-hydroksyeikosatetraenowego (12-HETE) wykazano biochemicznie w preparatach z płytek krwi / arachidonianu / jednojądrzastych traktowanych aspiryną, które wytworzyły wysokie poziomy TFa. Continue reading „Wzmocnienie jednojądrowej aktywności prokoagulacyjnej przez kwas 12-hydroksyeikosatetraenowy płytek krwi.”

Mechanizmy zaburzeń metabolizmu białek mięśniowych u szczurów z przewlekłą mocznicą. Wpływ kwasicy metabolicznej.

Przewlekła niewydolność nerek (CRF) jest związana z kwasicą metaboliczną i nieprawidłowym metabolizmem białek mięśniowych. Jak wykazaliśmy, że kwasica sama w sobie stymuluje degradację białka mięśniowego za pomocą mechanizmu zależnego od glukokortykoidów, oceniliśmy udział kwasicy w zmianach w obrocie białek mięśniowych w CRF. Stabilny model mocznicy osiągnięto u częściowo nefrektomizowanych szczurów (osoczowy mocznik azotu, 100-120 mg / dl, wodorowęglan krwi mniejszy niż 21 meq / litr). Szczury CRF wydalały o 22% więcej azotu niż kontrole z paszą (P poniżej 0,005), więc synteza i degradacja białka mięśniowego była mierzona w perfuzach tylnych. Szczury CRF miały 90% wzrost degradacji białka netto (P mniejsze niż 0,001); zostało to skorygowane przez wodorowęglan diety. Continue reading „Mechanizmy zaburzeń metabolizmu białek mięśniowych u szczurów z przewlekłą mocznicą. Wpływ kwasicy metabolicznej.”

Fosforylacja enzymu lizosomalnego w ludzkich fibroblastach. Parametry kinetyczne dają biochemiczne uzasadnienie dla dwóch różnych defektów w difosfo-N-acetyloglukozaminianach urydyny: prekursor enzymu lizosomalnego N-acetyloglukozoamina-1-fosfotransf

Pierwotnym defektem genetycznym w lizosomalnej chorobie zapalnej mukolipidozy III (ML III) jest enzym moczopędna difosfo-N-acetyloglukozamina: enzym lizosomowy N-acetyloglukozoamina-1-fosfotransferaza. Enzym ten ma dwie dobrze zdefiniowane funkcje: specyficzne rozpoznawanie enzymów lizosomalnych (funkcja rozpoznawania) i fosforylacja ich oligosacharydów (funkcja katalityczna). Korzystając z fibroblastów od pacjentów z ML III jako źródłem enzymu oraz alfa-metyloannozydu i dwóch enzymów lizosomalnych jako substratów, zidentyfikowaliśmy defekty obu tych funkcji. W jednej grupie fibroblastów aktywność katalityczna N-acetyloglukozaminylofosfotransferazy jest zmniejszona, podczas gdy zdolność rozpoznawania enzymów lizosomalnych jako specyficznych substratów pozostaje nienaruszona. W drugiej grupie fibroblastów zdolność do rozpoznawania enzymów lizosomalnych jest osłabiona, podczas gdy aktywność katalityczna enzymu jest prawidłowa. Continue reading „Fosforylacja enzymu lizosomalnego w ludzkich fibroblastach. Parametry kinetyczne dają biochemiczne uzasadnienie dla dwóch różnych defektów w difosfo-N-acetyloglukozaminianach urydyny: prekursor enzymu lizosomalnego N-acetyloglukozoamina-1-fosfotransf”

Biosynteza leukotrienów przez leukocyty polimorfojądrowe od dwóch pacjentów z przewlekłą chorobą ziarniniakową.

Polimorfonuklearne leukocyty (PMNL) wyizolowane od dwóch pacjentów z przewlekłą chorobą ziarniniakową (CGD) badano pod kątem ich zdolności do metabolizowania kwasu arachidonowego do produktów lipooksygenazy, w tym 5 (S), 12 (R) -dihydroksy-6,14-cis-8,10 kwas trans-eikozatetraenowy (LTB4). Analizy inkubacji tych PMNL z kwasem arachidonowym i jonoforem wapnia A23187 nie różniły się od jednoczesnych kontroli wytwarzania LTB4, innych kwasów 5,12-dihydroksy-eikozatetraenowych lub kwasów monohydroksy-eikozatetraenowych. Rozpoznanie kliniczne CGD potwierdzono w obu przypadkach przez oznaczenie chemiluminescencji PMNL. Leukocyty od obu pacjentów nie wytwarzały aktywnych gatunków tlenu w odpowiedzi na LTB4 lub formyl-metionyl-leucylo-fenyloalaninę. Obserwacja utleniania kwasu arachidonowego pod nieobecność anionu ponadtlenkowego wyklucza rolę aktywnych gatunków tlenu w tym procesie metabolicznym. Continue reading „Biosynteza leukotrienów przez leukocyty polimorfojądrowe od dwóch pacjentów z przewlekłą chorobą ziarniniakową.”

Limfocyty wiążące białko C-reaktywne podczas ostrej gorączki reumatycznej.

Limfocyty wiążące białko C-reaktywne (CRP) badano u 31 pacjentów z ostrą gorączką reumatyczną i 30 osobami kontrolnymi, które były dziećmi. Zaznaczone wzrosty w obu proporcjach i bezwzględna liczba limfocytów wiążących CRP odnotowano w gorączce reumatycznej (P mniej niż 0,001). Nie stwierdzono wyraźnej korelacji pomiędzy CRP w osoczu, jak określono ilościowo za pomocą testu radioimmunologicznego i proporcji lub liczby komórek wiążących CRP. Eksperymenty z podwójnym znakowaniem wykazały, że 60-80% limfocytów wiążących CRP również wykazywało receptory Fc reagujące ze sprzężonymi z fluoresceiną agregatami IgG. Przejście limfocytów przez kolumny Ig – anty-IgG, usunęło komórki z powierzchnią Ig, ale nie limfocytami wiążącymi CRP. Continue reading „Limfocyty wiążące białko C-reaktywne podczas ostrej gorączki reumatycznej.”