Rola aktywacji kinazy białkowej C w stymulacji proliferacji nabłonka okrężnicy i reaktywnego tworzenia tlenu przez kwasy żółciowe.

Deoksycholan (DOC), chenodeoksycholan, 12-O-tetradekanoiloforbol-13-octan (TPA) lub 1-oleoilo-2-acetylo-gliceryna (OAG) aktywowały kinazę nabłonka okrężnicy C, co odzwierciedla translokacja z substancji rozpuszczalnej do cząstek stałych. frakcja komórkowa. Aktywacja kinazy białkowej C była skorelowana ze stymulacją zwiększonej aktywności proliferacyjnej błony śluzowej okrężnicy i reaktywnego wytwarzania tlenu. TPA i OAG, ale nie DOC, aktywowały bezpośrednio in vitro kinazę rozpuszczalnego białka. Jednakże, DOC szybko zwiększył znakowaną akumulację fosforanu inozytolu i diacyloglicerolu w komórkach nabłonka okrężnicy. Continue reading „Rola aktywacji kinazy białkowej C w stymulacji proliferacji nabłonka okrężnicy i reaktywnego tworzenia tlenu przez kwasy żółciowe.”

Badania nad patogenezą typowej nerkowej kanalikowo-nerkowej typu I, ujawnioną w wyniku napięć Pco2 w moczu

Badanie to zostało zaprojektowane w celu zbadania patogenezy typu I (dystalnej) kwasicy kanalikowej nerki. Naprężenia Pco2 w moczu i krwi określano, gdy pH moczu było równe lub przekraczało odpowiednie pH krwi. Dało to wskazówkę o wydzielaniu netto jonów wodoru w dystalnym nerkorze. U 16 osób zdrowych wartość Pco2 w moczu przekroczyła wartości krwi (UB Pco2) o 32,7 . 3,1 mm Hg. Continue reading „Badania nad patogenezą typowej nerkowej kanalikowo-nerkowej typu I, ujawnioną w wyniku napięć Pco2 w moczu”

Zmniejszenie aktywności syntetazy uroporfirydynowej I w komórkach I w przerywanej ostrej porfirii

Intermittent ostrą porfirię ostatnio wyodrębniono biochemicznie z innych genetycznych porfirii wątrobowych poprzez obserwację zmniejszonej aktywności syntetazy wątrobowej uroporfirynogenu I i zwiększoną aktywność syntetazy kwasu . -aminolewulinowego. Ponieważ niedobór syntetazy uroporfirynogenu I może znaleźć odzwierciedlenie w tkankach nie wątrobowych, przetestowaliśmy ten enzym w hemolizatach czerwonych krwinek od osób nieperfirycznych i od pacjentów z genetyczną porfirią wątrobową. Jedynie pacjenci z przerywaną ostrą porfirią zmniejszyli aktywność syntetazy uroporfirynogenu erytrocytów, która wynosiła około 50% normy. Pozorna Km częściowo oczyszczonej syntetazy uroporfirynogenu I wynosiła 6 × 10 <6 m zarówno w przypadku substancji nieopijowych, jak i pacjentów z przerywaną ostrą porfirią. Continue reading „Zmniejszenie aktywności syntetazy uroporfirydynowej I w komórkach I w przerywanej ostrej porfirii”

Nowa funkcja lipoprotein o wysokiej gęstości. Ich udział w wewnątrznaczyniowych reakcjach bakteryjnych lipopolisacharydów.

Dodanie bakteryjnego lipopolisacharydu (LPS) z Escherichia coli 0111: B4 lub Salmonella minnesota R595 do osocza (lub surowicy) spowodowało wyraźne zmniejszenie uwodnionej gęstości pławności macierzystego LPS (0111: B4 [d = 1,44 g / cm3] i R595 [d = 1,38 g / cm3]) do d mniej niż 1,2 g / cm3. To zmniejszenie gęstości wyporności do mniej niż 1,2 g / cm3 LPS wymagało lipidy w osoczu (lub surowicy). Delipidowanie osocza (lub surowicy) przez ekstrakcję eterem n-butanol / diizopropylowym (40/60, obj .: obj.) Zapobiegło przekształceniu macierzystego LPS w postać o wartości d poniżej 1,2 g / cm3. Odwrócenie efektu delipidacji osiągnięto przez dodanie fizjologicznych stężeń lipoprotein o dużej gęstości (HDL). Natomiast dwa razy więcej niż normalne stężenie lipoprotein o niskiej gęstości lub bardzo małej gęstości było nieskuteczne. Continue reading „Nowa funkcja lipoprotein o wysokiej gęstości. Ich udział w wewnątrznaczyniowych reakcjach bakteryjnych lipopolisacharydów.”

Staphylococcus aureus Cowan I. Silny bodziec do produkcji reumatoidalnego czynnika immunoglobulinowego.

Badania te wykazują, że Staphylococcus aureus Cowan I (SAC), szczep A-dodatni gronkowca A-dodatniego, jest silnym i stałym induktorem wytwarzania reumatoidalnego czynnika IgM przez prawidłowe ludzkie jednojądrzaste komórki krwi obwodowej. Częstotliwość i wielkość tej odpowiedzi znacznie przewyższała częstotliwość równoległych kultur stymulowanych mitogenem szkarłatków lub białkowym szczepem S. aureus A-ujemnym A, chociaż wszystkie trzy czynniki indukowały podobną ilość całkowitej IgM. Badania frakcjonowania komórek wykazały, że indukowany SAC czynnik reumatoidalny IgM jest zależny od limfocytów T. Uderzająca zdolność SAC do indukowania reumatoidalnego czynnika IgM może odnosić się do jego zawartości białka A, ponieważ hodowle stymulowane za pomocą kulek sefarozowych sprzężonych z białkiem A także konsekwentnie wytwarzały to autoprzeciwciało. Continue reading „Staphylococcus aureus Cowan I. Silny bodziec do produkcji reumatoidalnego czynnika immunoglobulinowego.”

Fosforylacja enzymu lizosomalnego w ludzkich fibroblastach. Parametry kinetyczne dają biochemiczne uzasadnienie dla dwóch różnych defektów w difosfo-N-acetyloglukozaminianach urydyny: prekursor enzymu lizosomalnego N-acetyloglukozoamina-1-fosfotransf

Pierwotnym defektem genetycznym w lizosomalnej chorobie zapalnej mukolipidozy III (ML III) jest enzym moczopędna difosfo-N-acetyloglukozamina: enzym lizosomowy N-acetyloglukozoamina-1-fosfotransferaza. Enzym ten ma dwie dobrze zdefiniowane funkcje: specyficzne rozpoznawanie enzymów lizosomalnych (funkcja rozpoznawania) i fosforylacja ich oligosacharydów (funkcja katalityczna). Korzystając z fibroblastów od pacjentów z ML III jako źródłem enzymu oraz alfa-metyloannozydu i dwóch enzymów lizosomalnych jako substratów, zidentyfikowaliśmy defekty obu tych funkcji. W jednej grupie fibroblastów aktywność katalityczna N-acetyloglukozaminylofosfotransferazy jest zmniejszona, podczas gdy zdolność rozpoznawania enzymów lizosomalnych jako specyficznych substratów pozostaje nienaruszona. W drugiej grupie fibroblastów zdolność do rozpoznawania enzymów lizosomalnych jest osłabiona, podczas gdy aktywność katalityczna enzymu jest prawidłowa. Continue reading „Fosforylacja enzymu lizosomalnego w ludzkich fibroblastach. Parametry kinetyczne dają biochemiczne uzasadnienie dla dwóch różnych defektów w difosfo-N-acetyloglukozaminianach urydyny: prekursor enzymu lizosomalnego N-acetyloglukozoamina-1-fosfotransf”

Fibryna indukuje uwalnianie czynnika von Willebranda z komórek śródbłonka.

Dodanie fibrynogenu do ludzkich komórek śródbłonka żyły pępkowej w hodowli spowodowało uwolnienie czynnika von Willebranda (vWf) z ciał Weibel-Palade, które były czasowo związane z tworzeniem się fibryny w pożywce. O ile nie nastąpiło uwolnienie przed żelowaniem, tworzenie fibryny wiązało się ze zniknięciem ciał Weibel-Palade i rozwojem zewnątrzkomórkowych plam immunofluorescencji typowych dla uwalniania vWf. Uwalnianie nastąpiło również w ciągu 10 minut od ekspozycji na wcześniej wytworzoną fibrynę, ale nie pojawiło się po ekspozycji na przemyte krwinki czerwone, płynny skrzep lub strukturalnie różną fibrynę przygotowaną z użyciem reptilazy. Metabolicznie znakowany vWf został oczyszczony z pożywki po uwolnieniu przez fibrynę i wykazał, że składa się z wysoko przetworzonego białka pozbawionego podjednostek pro-vWf. Udział resztkowej trombiny w uwalnianiu stymulowanej przez fibrynę zminimalizowano przez przygotowanie skrzepów fibryny z nie stymulującym stężeniem trombiny i przez hamowanie pozostałości trombiny za pomocą hirudyny lub ogrzewanie. Continue reading „Fibryna indukuje uwalnianie czynnika von Willebranda z komórek śródbłonka.”

Wpływ kortykosteroidów in vitro na aktywację, proliferację i różnicowanie komórek B.

Niniejsze badanie pokazuje stopniowy wpływ kortykosteroidów in vitro (CSs) na różne fazy aktywacji, proliferacji i różnicowania komórek B. Wczesne zdarzenia, takie jak aktywacja i proliferacja komórek B o wysokiej dawce anty-mu lub stymulowanych przez Staphylococcus aureus, są głęboko tłumione przez obecność CS in vitro. W hamowanej odpowiedzi proliferacyjnej może pośredniczyć bezpośredni wpływ na komórki B i / lub modulacja funkcji komórek pomocniczych. Późniejsze zdarzenia w cyklu komórek B, takie jak odpowiedź proliferacyjna na czynnik wzrostu komórek B po aktywacji in vivo lub in vitro, są mniej wrażliwe na działanie hamujące CS in vitro. Ostatnie wydarzenia w cyklu komórek B; mianowicie, zróżnicowanie do stanu wytwarzania immunoglobuliny, nie jest tłumione przez CS in vitro. Continue reading „Wpływ kortykosteroidów in vitro na aktywację, proliferację i różnicowanie komórek B.”